三重实时荧光RT-PCR检测三种鱼类弹状病毒的研究

摘要：

鱼传染性造血器官坏死病病毒(Infectious hematopoietic necros virus IHNV)、鱼病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV)和鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus SVCV)是同属弹状病毒科(Rhabdoviridae)的3种鱼类病毒,也是影响水产养殖业的3种重要病毒.通过对这3种病毒基因序列的分析,在病毒基因的高保守区域,设计了3条分别针对这3种病毒的TaqmanMGB探针,并选择3种无相互干扰的荧光基团进行标记.以此为基础建立针对该3种病毒的三重实时荧光RT-PCR的检测方法.通过反应条件的优化,该三重实时荧光RT-PCR最低可检测至102拷贝/反应的病毒量.同时.该方法还对病毒混合感染EPC细胞(Epithelioma papulosum cyprini)和攻毒斑马鱼进行了检测.实验结果表明,该方法是一种特异、灵敏、高效的病毒检测方法.

关键词：IHNV、VHSV、SVCV、Taqman MGB探针、三重实时荧光RT-PCR

所属期刊栏目：19

分类号：S941.41;Q503(水产保护学)

资助基金：国家质检总局科技项目2007IK031

在线出版日期：2009-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：5-10