10.3969/j.issn.1674-5354.2005.z1.002
岩沙海葵毒素直接酶联免疫吸附检测方法的研究
[目的]制备岩沙海葵毒素(PTX)多抗血清,纯化并标记辣根过氧化物酶,建立PTX多克隆直接酶联免疫吸附检测方法.[方法]将纯品毒素PTX与大分子蛋白质匙眼血蓝蛋白(KLH)分别巯基化,用化学法偶联二者成为半抗原,以其诱导BALB/c小鼠产生多价抗血清;以辣根过氧化物酶(HRP)标记PTX多抗血清;以PTX纯毒素作为包被抗原,HRP标记的多价抗血清为酶标抗体,建立PTX多抗直接ELISA检测方法.[结果]制备的抗PTX多价抗血清,经纯化后与HRP标记成功;建立的PTX多抗直接ELISA检测法,其最佳工作浓度为1:80.[结论]本研究制备的PTX人工免疫抗原具有较高的特异性和免疫原性,多克隆抗体为特异性抗PTX抗体,PTX多抗直接ELISA检测法对PTX的检测可达到5~10ug水平,该法应用于海产品中PTX快速检测的结果,待进一步研究.
岩沙海葵毒素、多克隆抗体、酶联免疫吸附实验
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R185(流行病学与防疫)
国家科持攻关项目2001BA804A20-2-4
2006-05-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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