UPRmt改善乙醇诱导的肝细胞坏死性凋亡的分子机制研究

摘要：

背景 坏死性凋亡作为一种新型程序性细胞死亡方式参与酒精性肝病的发生发展.线粒体未折叠的蛋白质反应(mitochondrial unfolded protein response,UPRmt)能够促进应激反应中细胞修复并改善线粒体网络的调控,探究乙醇诱导下肝细胞内UPRmt调控机制可能为酒精性肝病的临床治疗提供新的潜在靶点.目的 探讨UPRmt对乙醇诱导下肝细胞线粒体功能和坏死性凋亡的影响,及其在肝细胞线粒体网络中的作用机制.方法 利用正常小鼠肝细胞AML12构建正常对照组、乙醇组、UPRmt激活对照组、UPRmt激活乙醇组模型.经浓度 250 mmol/L无水乙醇培养细胞构建乙醇组模型,通过造模前6h给予 10μmol/L寡霉素A激活正常小鼠肝细胞UPRmt构建干预组.利用RT-PCR检测UPRmt、线粒体分裂和坏死性凋亡相关基因转录水平,荧光探针观察线粒体功能,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白表达水平.结果 乙醇诱导下UPRmt相关基因mtDNAj、CHOP、ATF5和炎症因子TNF-α、IL-6、Timp1转录水平升高,坏死性凋亡关键基因RIPK3、PGAM5表达增加(P＜0.05).荧光探针观察到乙醇诱导下线粒体膜电位显著下降,线粒体ROS产生量增多(P＜0.05),蛋白免疫印迹结果显示乙醇诱导下肝细胞内线粒体自噬被抑制,线粒体分裂增加.寡霉素A干预增强细胞内UPRmt,从而改善乙醇诱导下炎症产生和氧化应激,维持线粒体正常功能,抑制肝细胞坏死性凋亡.结论 UPRmt通过减少细胞氧化应激、维持线粒体正常功能,从而缓解乙醇诱导的肝细胞坏死性凋亡和炎症损伤.

关键词：酒精性肝病、线粒体未折叠蛋白反应、坏死性凋亡、线粒体质量控制、线粒体自噬

所属期刊栏目：44

分类号：R363.1(病理学)

资助基金：解放军总医院优青培育课题;解放军总医院青年自主创新科学基金项目

在线出版日期：2023-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：700-707