神经生长因子对小鼠颌骨骨髓间充质干细胞增殖、迁移、分化及凋亡的影响

摘要：

背景 神经生长因子(nerve growth factor,NGF)是神经营养因子中的一类,能够促进中枢及外周神经元加速生长,修复损伤的神经系统,有研究证实NGF能促进中胚层来源的长骨骨髓间充质干细胞的成骨分化及骨形成,而NGF对外胚层来源的颌骨骨髓间充质干细胞(jaw bone marrow mesenchymal stem cells,JBMMSCs)生物学特性的影响尚不明确.目的 探讨NGF对JBMMSCs增殖、迁移、分化及凋亡特性的影响.方法 原代培养小鼠JBMMSCs并鉴定.取第二代JBMMSCs加入含 50 ng/mL NGF培养液孵育 72h后,通过CCK-8、qRT-PCR、Western blot及免疫荧光(immunofluorescence,IF)等方法检测细胞增殖及其相关标志物MCM-2、Ki67的表达;qRT-PCR、Western blot检测凋亡相关标志物Bcl-3、Bax的表达;划痕实验检测JBMMSCs迁移能力;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、qRT-PCR、Western blot及IF检测成骨相关标志物表达.结果 CCK-8结果显示,50 ng/mL NGF可显著增强JBMMSCs第 3天及第 5天的OD值,Western blot及IF结果显示,50 ng/mL NGF可显著增强JBMMSCs中增殖标志物Ki67、MCM-2的蛋白水平;划痕实验结果显示,50 ng/mL NGF可显著提高JBMMSCs的迁移率,有效缩小各个时间点的划痕面积;50 ng/mL NGF可有效增强JBMMSCs的碱性磷酸酶活性,上调ALP、OCN、RUNX2、BMP2的mRNA表达水平及ALP、OCN、BMP2、OPN、RUNX2的蛋白水平;此外,50 ng/mL NGF还可上调Bcl-2的mRNA及蛋白表达水平,下调Bax的mRNA及蛋白表达水平.结论 50 ng/mL NGF能有效提高JBMMSCs增殖、迁移及成骨分化能力,同时抑制其凋亡.

关键词：颌骨骨髓间充质干细胞、神经生长因子、增殖、凋亡、迁移、干细胞成骨分化

所属期刊栏目：44

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金;北京市自然科学基金面上项目

在线出版日期：2023-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：541-548