C型利钠利尿肽基因转染对骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响

摘要：

目的 研究C型利钠利尿肽(C-type natriuretic peptide,CNP)基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成软骨分化能力的影响,为实现高质量基于间充质干细胞的组织工程软骨构建奠定基础.方法 采用全骨髓培养法分离SD大鼠BMSCs并进行传代培养及多向分化能力鉴定.将已构建的含有人CNP基因和增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因的重组腺病毒(Ad-NPPC-eGFP)按照特定转染复数(multiplicity of infection,MOI)转染BMSCs,通过流式细胞仪检测转染效率,Real-time PCR检测转染后CNP mRNA表达情况,MTT实验检测转染后对细胞增殖的影响,阿尔新蓝染色检测转染后BMSCs体外诱导14 d及21 d时成软骨情况.结果 成功获取了大鼠BMSCs,成脂、成骨分化诱导结果表明其具有较好的多向分化能力.腺病毒转染后细胞状态良好,转染效率较高,且未对细胞增殖产生显著影响(P>0.05),转染后BMSCs CNP mRNA高表达(P<0.05),体外成软骨能力强于未转染CNP基因组(P<0.05).结论 含有CNP基因的重组腺病毒可在SD大鼠BMSCs中稳定表达,并表现出较好的体外诱导成软骨能力.

关键词：骨髓间充质干细胞、C型利钠利尿肽、重组腺病毒、软骨组织工程

所属期刊栏目：38

分类号：R318(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目31170926;国家自然科学基金应急项目81541111;吴阶平医学基金会临床科研专项资助 320. 6750.15029 Supported by the Natural Science Foundation of China31170926;National Natural Science Foundation of China emergency management project81541111;Clinical Scientific Research Fund from Wu Jieping Medical Foundation320.6750.15029

在线出版日期：2017-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：531-535,544