组织金属蛋白酶抑制剂-1低表达系膜细胞模型的建立

摘要：

目的：利用3种不同组织金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitors of metalloproteinase-1，TIMP-1) siRNA转染大鼠系膜细胞，建立高效、稳定的TIMP-1低表达系膜细胞模型，为肾疾病研究奠定实验基础。方法分别设计合成3条TIMP-1特异性siRNA序列，并以标记了绿色荧光基团6-羧基荧光素(6-carboxy-fluorescein，FAM)的无义siRNA作为对照，利用脂质体转染方法转染原代大鼠系膜细胞，收集转染后48 h的细胞，利用荧光显微镜观察绿色荧光，明确其转染成功率；同时用Trizol法分离提取系膜细胞的总RNA，利用Taqman探针方法检测试验组及对照组TIMP-1的mRNA表达水平。结果荧光显微镜观察，利用脂质体转染方法，siRNA转染效率可以达到90%以上；Taqman探针荧光定量PCR结果显示，3种不同序列的siRNA均有抑制TIMP-1表达的作用(P＜0.01)，且siTIMP1-1的效果最佳。结论本研究利用siRNA转染技术，成功建立了TIMP-1低表达系膜细胞模型。

关键词：组织金属蛋白酶抑制剂-1、小干扰RNA、系膜细胞

分类号：R692(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

资助基金：国家自然科学基金项目81330019；81270794；国家重大科学研究计划项目2011CB944000Supported by the National Natural Science Foundation of China81330019,81270794;National Science and Technology Major Project2011CB944000

在线出版日期：2015-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：826-828