Gateway技术构建转基因重组质粒pRP.EX3d-EF1A-LRP16-His-IRES-eGFP

摘要：

目的：构建转基因重组质粒pRP.EX3d-EF1A-LRP16-His-IRES-eGFP，为转基因鼠的建立奠定基础。方法利用重叠PCR技术扩增attB1-LRP16-His-attB2，经BP反应，将LRP16基因插入到载体pDown上，pUp-EF1A、pDown-LRP16-His、pTail-IRES-eGFP和PRP.Des3d经LR反应，将LRP16转移到pRP.EX3d上，转化Stbl3细胞，用氨苄西林进行抗性筛选，经PCR鉴定后将阳性克隆送测序。结果测序及酶切结果验证获得正确的pRP.EX3d-EF1A-LRP16-His-IRES-eGFP重组质粒。结论成功构建pRP.EX3d-EF1A-LRP16-His-IRES-eGFP重组质粒，可用于下一步LRP16转基因小鼠的构建。

关键词：LRP16、转基因小鼠、质粒、Gateway技术

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金项目31270820；81230061；81072109；北京市科技新星计划2011113@@@@Supported by the National Natural Science Foundation of China31270820,81230061,81072109;Beijing Nova Program2011113

在线出版日期：2014-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：258-260