ID4基因启动子克隆及表达调控载体的构建
目的 深入研究ID4基因的表达调控机制.方法 在NCBI人类基因组数据库中截取并下载ID4基因转录起始位点上游5'侧翼区约2 242bp及下游5'非翻译区212bp的基因组序列,设计PCR扩增引物,采用分段扩增法,从健康人外周血中扩增获得2条长度分别为1 829bp和784bp的产物片段,插入用于表达调控研究的pGL3 Basic荧光素酶报告载体,实现连接,经测序鉴定.以此为基础进行亚克隆,分别获得5条5'端不等、3'端平齐的片段,插入pGL3 Basic载体.结果 获得了6条长度依次差别约为400bp的ID4启动子克隆,分别构建了调控荧光素酶报告基因的真核表达载体.结论 成功克隆了人ID4基因启动子并构建了表达调控载体,为研究ID4启动子活性及表达调控奠定了基础.
基因、ID4、启动区(遗传学)、基因表达调控
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Q782(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金项目30873086,30772597
2012-06-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
799-801,804