胃癌相关基因GCRG213小干扰RNA表达载体的构建及其对胃癌细胞生长特性的影响

摘要：

目的 研究胃癌相关基因GCRG213 siRNA转染对胃癌细胞MKN45的影响.方法 1)设计两对针对GCRG213可转录为小干扰RNA(siRNA)的DNA片段,退火后插入小干扰RNA表达载体IMG-800.2)测序正确的重组子IMG-800-1,IMG-800-2和空载体转染MKN45细胞,采用RT-PCR及Western法比较GCRG213在mRNA和蛋白质水平上的表达差异.3)绘制细胞生长曲线,分析细胞的增殖状态,检测凋亡细胞.结果 1)干扰片段正确插入小干扰RNA表达载体IMG-800.2)重组子和空载体转染MKN45细胞.3)转染siRNA的MKN45细胞中其mRNA的表达下调44.9%和49.5%;其蛋白的表达下调55.3%和64.2%.4)转染siRNA的MKN45细胞生长增殖速度减慢,处于G0-G1期的细胞增加,G2/M期和/或S期的细胞比例减少,细胞凋亡率增加.结论 siRNA转染可抑制肿瘤细胞的生长和增殖,促进肿瘤细胞的凋亡.

关键词：基因表达调控、肿瘤、RNA干扰、细胞生长过程、细胞凋亡

所属期刊栏目：30

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目20370635Supported by National Natural Science Foundation of China20370635

在线出版日期：2012-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：514-516