基因表达谱芯片技术筛选乙型肝炎病毒DNA多聚酶P结构域反式调节基因

摘要：

目的:应用基因芯片技术,对乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA)聚合酶P结构域蛋白/逆转录酶(PR)的基因表达谱进行分析,探索PR对肝细胞基因表达的调节机制及其生物学功能.方法:设计并合成PR基因序列特异性的引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增PR蛋白编码基因片段,以常规的分子生物学技术将获得的PR编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定,构建真核表达载体pcDNA3.1(-)-PR.以脂质体转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA3.1(-)的HepG2细胞进行DNA芯片分析.结果:基因芯片技术所检测的1 152个基因表达谱的筛选中,79条基因表达水平上调,90条基因表达水平下调.结论:应用基因表达谱芯片成功筛选了HBV DNA聚合酶PR转染细胞后差异表达基因,为进一步阐明PR蛋白可能的分子生物学机制提供依据.

关键词：肝炎病毒、乙型、DNA多聚酶、基因

所属期刊栏目：26

分类号：R373.21(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金C03011402,C30070689;军队科技攻关项目98D063;军队科研项目98H038;军队科技攻关项目01Q138;军队科技攻关项目01MB135

在线出版日期：2005-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：107-109