GFP阳性细胞在不同荧光通道下的凋亡检测比较

摘要：

目的 比较GFP阳性细胞在不同荧光通道下的凋亡检测效果.方法 使用流式细胞技术选用Annexin V-PE/7-AAD双标法检测GFP阳性细胞的凋亡,采用三色均用488 nm激光激发,和GFP用488 nm激光激发,PE、7-AAD用561 nm激光激发两种方案.结果 仅使用488 nm激光器,可见GFP/PE/7-AAD三色之间漏光严重,均需补偿且补偿值极大,样品管补偿前后的PE/7-AAD双参数散点图形态改变极大.而第二种方案可见GFP往PE和7-AAD漏光少,补偿值极小甚至不用补偿,PE与7-AAD之间补偿极大,样品管补偿前后的PE/7-AAD双参数散点图形态改变大,但形态改变明显小于均用488 nm激光器激发的图形.用两个方案检测的凋亡率基本一致.结论 实验室应根据所拥有流式细胞仪的激光和荧光通道滤光片的配置来选择最适合的凋亡试剂盒.如果仪器允许,尽量采用多激光激发减少光谱重叠.若有561 nm激光器,其拓展了荧光通道的选择,减少了补偿带来的麻烦,有更多的优势.若只有488 nm未配561 nm激光的小型流式细胞仪,可通过齐全的单阳管设置,合适的荧光补偿调节也可以获得满意的检测结果.

关键词：流式细胞术;细胞凋亡;GFP阳性细胞;绿色荧光蛋白(GFP);荧光补偿;荧光通道

所属期刊栏目：35

分类号：R331(人体生理学)

在线出版日期：2021-12-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：164-165