黄颡鱼长型肽聚糖识别蛋白（pfPGRP－L）原核表达和多克隆抗体的制备

摘要：

为进一步研究肽聚糖识别蛋白（peptidoglycan recognition proteins，PGRPs）在先天性免疫应答中的生物学功能，在前期克隆黄颡鱼长型肽聚糖识别蛋白（pfPGRP－L） cDNA 全长的基础上，根据 pfPGRP－L 基因中高亲水性区域序列设计特异性引物扩增出编码序列，将该基因片段克隆到 pGEX－4T－1质粒，构建重组表达载体。SDS－PAGE 电泳检测该目的蛋白大小约为51 ku，与理论值大小符合，回收蛋白并纯化，与弗氏佐剂等量混合后注射新西兰大白兔制备多克隆抗体，用 ELISA 和 Western blotting 分别检测该抗体，结果显示：抗体效价可达1∶256000，且有特异性条带，表明 pfPGRP－L 的多克隆抗体制备成功。此外，Western blotting 检测黄颡鱼不同组织 pfPGRP－L 蛋白的表达，发现在鳃、胸腺、肝脏、肾脏、头肾、脾脏、血液和肠道等不同组织中都有目的条带，而在脾脏和肠道中表达更强。为 pfPGRP－L 的抗菌作用和功能研究奠定基础。

关键词：长型肽聚糖识别蛋白、原核表达、多克隆抗体、黄颡鱼

所属期刊栏目：38

分类号：S965.199(水产养殖技术)

资助基金：江西省科技厅科技项目和江西省教育厅项目20111BBF60021、20114BAB214002和 GJJ14286 Project supported by Jiangxi Provincial Department of Science ＆ Technology and Jiangxi Provincial Educational Department Foundations of China 20111BBF60021，20114BAB214002 and GJJ14286

在线出版日期：2016-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：723-728