降低木质素、提高抗逆性的无标记植物表达载体的构建

摘要：

采用高保真酶用PCR方法从pMD18-BADH载体上扩增出目的基因BADH,替换pBI121质粒中的gus基因,构建pBI121-BADH植物表达载体.经过2对引物检测,证明pBI121-BADH载体构建正确.又从pBI121-BADH质粒中扩增出35s-BADH-nos片段,所用引物加上了Nhe I和Cla I接头,扩增片段经回收后插入到pUCm-T载体中测序.测序表明,所扩增的35s-BADH-nos片段与模版同源性为100%.将测序正确的质粒pUCm-35s-BADH-nos用Nhe I和Cla I酶切后连接到进行了相同酶切的pBI121-xylA载体上,用35s-BADH-nos片段取代pBI121-xylA载体上的npt II基因片段,构建pBI121-xylA-BADH双元植物表达载体,该载体经PCR检测和酶切检测,与预期结果相同.最后,用Pme I、Cla I从pBI121-xylA-BADH上切出片段35s-BADH-nos,将其连接到进行了相同酶切的pt4CL1-p载体上,使35s-BADH-nos片段取代pt4CL1-p载体上的npt II基因片段,构建了无选择标记的反义4CL-BADH植物双元表达载体.

关键词：反义4CL基因、甜菜碱醛脱氢酶基因、无选择标记、植物表达载体

所属期刊栏目：30

分类号：Q945.7(植物学)

资助基金：国家"863"高技术研究发展计划项目2002AA241111;北京市教委项目KM200710020007

在线出版日期：2009-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1104-1110