大血藤ISSR-PCR反应体系的建立

摘要：

采用改进的SDS法抽提大血藤基因组DNA,分析了镁离子、dNTP、模板DNA含量、引物浓度、Taq DNA 聚合酶量和BSA浓度对大血藤ISSR-PCR扩增结果的影响,建立了稳定的、可重复的大血藤ISSR最佳反应体系:10 μL PCR 反应体积中, 4×Taq 酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris-HCl, pH9.0,50 mmol/L KCl , 1 g/L Triton X-100),0.5U Taq DNA聚合酶,2 mmol/L MgCl2,0.1 mmol/L dNTP,12 pmol 引物,10 ng 模板 DNA,2 mg/mL牛血清白蛋白.大血藤的最适退火温度为52.4 ℃.

关键词：大血藤、ISSR、反应体系、优化

所属期刊栏目：28

分类号：Q948.1(植物学)

资助基金：国家自然科学基金39870160;浙江省高等学校中青年教师资助计划2003

在线出版日期：2006-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：583-586