耦合透性化辅酶循环制备手性(R)-苯基乙醇

摘要：

通过耦合透性化博伊丁假丝酵母(Candida boidinii,C.boidinii)加强了近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis,C.parapsilosis)内羰基还原酶(Carbonyl reductase,CR)催化反应中的辅酶循环与反复利用,构建了有效的手性(R)-苯基乙醇透性化细胞耦合制备体系.实验结果如下:透性化的C.parapsilosis细胞底产物渗透效果增强,底物转化率由33.5％提升到43.8％;进一步外添加辅酶后,底物转化率由43.8％提高到了52.1％;耦合透性化C.boidinii细胞并同时外添加辅酶可大大增强辅酶循环效率,底物转化率可提高至71.8％.优化透性化细胞耦合体系反应条件,当以0.2g近平滑假丝酵母(C.parapsilosis)为基准时,在C.parapsilosis与c.boidinii细胞质量比为1.5∶1,底物浓度为10 mmol/L,辅酶浓度为0.1 mmol/L时,底物转化率可达78.2％.离心法收集细胞进行多批次反应,当反应12批次时,耦合体系仍然保持有55％底物转化率,此时总的底物转化率达70.3％,产物经高效液相色谱测定为(R)-苯基乙醇,对映体过量值(e.e.值)达98.2％.

关键词：透性化细胞、辅酶再生、羰基还原酶、甲酸脱氢酶、(R)-苯基乙醇、生物工程

所属期刊栏目：33

分类号：Q552(酶)

在线出版日期：2017-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1219-1226