利用荧光染色和流式细胞技术辅助卵孢小奥德蘑原生质体制备与再生研究

摘要：

本研究以卵孢小奥德蘑液体培养菌丝作为实验材料,利用单因子变量法探索研究了菌丝培养时间、酶浓度、酶解时间、酶解温度、稳渗剂类型对卵孢小奥德蘑原生质体制备的影响,并对原生质体再生培养基进行选择和优化.通过荧光染色,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪对原生质体的制备过程、得率和活力进行研究.结果 表明,将卵孢小奥德蘑菌丝在液体培养基中培养5d收集菌丝体,以甘露醇作为渗透压稳定剂,在溶壁酶浓度2％、30℃条件下酶解5h,获得的原生质体得率最高,达2.0×107个/mL;通过流式细胞仪分析,约57.69％的原生质体细胞为活细胞;在RM培养基中再生效果最好,再生率为(0.103+0.025)％.研究结果可以为卵孢小奥德蘑育种与食用菌原生质体制备再生提供研究基础.

关键词：卵孢小奥德蘑、原生质体制备、原生质体再生、荧光染色、流式细胞术

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资助基金：山东省现代农业产业技术体系食用菌创新团队;十三五国家重点研发计划“现代食品加工及粮食收储运技术与装备”重点专项

在线出版日期：2020-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：1356-1367