糙皮侧耳Pleurotus ostreatus子实体凝集素基因polectin2及其启动子的克隆及功能鉴定
凝集素在食用菌的生长发育、抗病虫等逆境及抗肿瘤等方面发挥着重要的作用,但是关于糙皮侧耳凝集素基因的抗逆功能研究还比较薄弱.因此,本文利用PCR技术克隆得到糙皮侧耳子实体凝集素polectin2基因及其启动子序列,测序和生物信息学结果显示该基因不含内含子,完整开放阅读框为408bp,编码136个氨基酸,预测蛋白分子量15.3kDa;启动子polectinpro序列长度为927bp,生物数据库PLACE分析结果表明polectinpro含有低温、干旱胁迫诱导和病程相关等抗逆元件.然后,构建含有GFP融合蛋白的重组植物表达载体pCAMBIA1302-polectinpro-gfp,并进行烟草遗传转化,结果证明该启动子能够在低温诱导下驱动gfp基因表达.同时成功构建了含有polectin2的重组植物表达载体pCAMBIA1301-polectin2并进行了烟草遗传转化;对阳性转化植株T1代和野生型种子进行低温胁迫实验,结果表明转基因种子萌发率明显高于野生型.综上所述,推测polectin2基因具有耐低温功能,且其启动子具有低温诱导活性.上述结果为进一步利用子实体凝集素polectin2基因提高食用菌的耐低温等抗逆功能提供了理论依据和技术支持.
糙皮侧耳、凝集素基因、低温、功能验证、转化植株
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S64;S60
公益性行业农业科研专项201503137;973项目2014CB138305;吉林省秸秆综合利用技术创新平台吉高平合字[2014] B-1;吉林农业大学校内启动基金2015007;吉林省科技发展项目20140101148JC;the Special Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest201503137;National Program on Key Basic Research Project 973 Program2014CB138305;University S & T Innovation Platform of Jilin Province for Economic Fungi2014B-1;Fund of Jilin Agricultural University2015007;Scientific and Technological Planning Project of Jilin Province20140101148JC
2017-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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