SP-D基因真核表达质粒的构建及鉴定

摘要：

目的 构建并鉴定含肺表面活性蛋白D(SP-D)基因的重组真核表达质粒.方法 提取A549细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增含SP-D基因的cDNA,将产物克隆进真核载体pGEFP-N1内,构建含SP-D基因的重组真核表达质粒.将pGEFP-N1-SP-D重组质粒和pGEFP-N1空载体分别转染293T细胞,Western blot法检测SP-D的蛋白表达.结果 双酶切鉴定及核酸序列分析证实,SP-D已成功插入真核载体pGEFP-N1内.转染pGEFP-N1-SP-D的293T细胞中检测到高表达的SP-D蛋白.结论 成功构建含SP-D基因的重组真核表达质粒,并能在293T细胞中高表达.

关键词：肺表面活性蛋白D、真核表达载体

所属期刊栏目：42

分类号：R722(儿科学)

资助基金：国家自然科学基金81170487;江苏省妇幼保健重点学科项目FXK201212

在线出版日期：2016-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：376-378