干扰素基因刺激因子启动子的克隆、鉴定及活性分析

摘要：

目的 克隆和鉴定干扰素基因刺激因子(STING)基因上游启动子序列,并评价其在人胚肾HEK-293T细胞中的启动活性.方法 以人全血DNA为模板,PCR扩增STING启动子区2154 bp序列.将此片段亚克隆至pGL-3基本载体荧光素酶报告基因上游的多克隆位点,构建重组报告质粒pGL-3/STING.转染HEK-293T细胞,检测其荧光素酶活性,并利用生物信息学方法分析转录因子结合位点.结果 经酶切、测序鉴定,成功构建了含有STING启动子序列的表达质粒.与pGL-3基本质粒相比,pGL-3/STING启动子的相对荧光素酶活性增加(P＜0.01).STING启动子区域含SRY、HSF、AP1、Sp1/3、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白和GATA-1等多个转录因子结合序列.结论 STING转录起始位点上游2154 bp区域在HEK-293T细胞中具有较强的启动活性.

关键词：干扰素基因刺激因子、启动子活性

所属期刊栏目：41

分类号：R729(儿科学)

资助基金：国家自然科学基金青年项目81302531;江苏省自然科学基金青年基金项目BK20131018

在线出版日期：2015-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1489-1491