PEGFP-N1-CDX2真核表达质粒的构建及其在SGC-7901细胞中的表达
目的 构建尾型同源盒转录因子2(CDX2)基因真核表达质粒PEGFP-N1-CDX2,并观察其在胃癌细胞中的表达.方法 采用RT-PCR技术从胃癌细胞中扩增CDX2,并将PCR产物双酶切后定向克隆入PEGFP-N1的多克隆位点,构建PEGFP-N1-CDX2重组质粒.经过双酶切及测序验证后,采用阳离子聚合物转染介导将PEGFP-N1-CDX2重组质粒转染胃癌SGC-7901细胞(C组),随后实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot检测未转染组(A组)、转染PEGFP-N1组(B组)和C组细胞CDX2的表达情况.结果 重组质粒经Xho Ⅰ和HindⅢ双酶切和测序与CDX2基因序列一致,利用阳离子聚合物转染试剂介导将PEGFP-N1-CDX2重组质粒成功转染到胃癌SGC-7901细胞中,并获得了CDX2基因的高表达.结论 成功构建PEGFP-N1-CDX2真核表达质粒,并在SGC-7901细胞内高表达.
尾型同源盒转录因子2、真核表达质粒、胃癌
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R730(肿瘤学)
2013-11-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
1996-1999