人PD-1基因克隆及其在L929基因转染细胞上的表达

摘要：

目的克隆人PD-1基因,构建含有该目的基因的重组逆转录病毒载体,并转染入L929细胞,获得稳定高表达PD-1分子的L929细胞.方法用PCR法从pGEX-5X-3-PD-1扩增出PD-1基因,通过双酶切(PstI BamHI)装入逆转录病毒载体pGEZ Term中,脂质体法共转染包装细胞293T,用含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清感染L929细胞,72 h后,加入Zeocin进行筛选,挑选出能稳定表达PD-1分子的L929细胞株.结果成功克隆了人PD-1基因,构建了含PD-1基因的重组逆转录病毒载体,包装出具有感染能力的重组PD-1逆转录病毒,筛选出具有稳定表达人PD-1分子的L929基因转染细胞.经流式细胞仪检测:PD-1分子在L929基因转染细胞中具有高表达,达到97.6%.结论构建了含人PD-1基因重组逆转录病毒的载体,筛选出稳定表达人PD-1分子的L929细胞株.

关键词：PD-1基因、逆转录病毒

所属期刊栏目：32

分类号：R3(基础医学)

资助基金：科技部科研项目2001CB51003;江苏省高校自然科学基金03KJB3201120;苏州大学校科研和教改项目EE132031

在线出版日期：2006-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：561-563