逆转录病毒介导耐药基因的高效表达

摘要：

目的建立多药耐药基因MDR1的逆转录病毒转移系统.方法脂质体转染法将携带MDR1基因的逆转录病毒载体HaMDR导入单向型包装细胞GP+E86;用获得的单向型病毒重复转导双嗜型包装细胞GP+envAm12,经秋水仙碱加压选择获得高滴度的病毒生产细胞Am12/HaMDR;MDR1基因的转移和表达用聚合酶链反应(PCR)、MTT比色法和流式细胞术(FCM)分析.结果单向型与双嗜型病毒生产细胞的滴度分别为6.2×105和9.0×105CFU/ml;PCR分析证实生产细胞有MDR1基因整合并稳定表达,但同时存在异常剪接的转录本;MTT比色法和FCM分析显示MDR1基因转移细胞的耐药程度提高12～267倍,P-糖蛋白表达率达97%～99%.结论逆转录病毒可有效介导MDR1基因转移和表达,为导入造血干/祖细胞后进行根治性化疗奠定基础.

关键词：逆转录病毒、基因转移、基因治疗、基因、MDR、基因表达

所属期刊栏目：26

分类号：R3(基础医学)

资助基金：江苏省卫生厅科研项目H9549

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：264-266