多重PCR和纳米孔测序结合检测消化道病原体方法及其评价

摘要：

目的 建立多重PCR和纳米孔测序相结合的检测方法,为实现消化道病原体现场高灵敏度快速检测奠定基础.方法 通过设计消化道病原体特异性引物,验证引物特异性,优化多重PCR扩增条件,构建快速建库测序体系,对病原体的检测灵敏度进行评价.结果 建立的12种消化道病原体多重PCR检测体系可以对所有靶序列进行有效扩增.经测序检测,当引物池中每条引物浓度为0.1 μmol/L时,12种病原体混合DNA模板和3种轮状病毒A、B、C的混合RNA样品检测灵敏度均可达到103 拷贝/ml.结论 该方法可在短时间内完成消化道病原体的鉴定,提升突发公共卫生事件中现场病原体检测效率,有望在疫情防控中发挥重要作用.

关键词：纳米孔测序技术、多重PCR、消化道病原体、病原体检测、灵敏度

所属期刊栏目：47

分类号：TB383;R378(工程材料学)

在线出版日期：2023-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：590-595