骨形成蛋白4对小鼠骨髓造血干/祖细胞体外扩增的作用研究

摘要：

目的 探究骨形成蛋白4(BMP4)对小鼠造血干/祖细胞(HSPC)体外扩增的作用.方法 用磁珠分选法富集小鼠骨髓细胞中的c-Kit+造血细胞,分成对照组(添加基础培养基)及实验组(每天补充40 ng/ml BMP4)进行体外培养.培养4d后,进行细胞计数及存活率分析,并结合流式细胞术分析细胞中HSPC的比例及数量,采用造血集落形成实验分析细胞的造血集落形成能力.在此基础上,结合BMP4信号通路抑制剂LDN193189(500 nmol/L)处理,通过流式细胞术检测阻断该信号通路对细胞中HSPC比例的影响,并结合实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析细胞中毒性应激和凋亡相关基因表达水平.结果 c-Kit+造血细胞体外培养4d后,对照组及实验组细胞数量分别是起始接种数量的(3.20±0.33)倍及(5.00±0.61)倍.结合流式细胞术对细胞中HSPC比例分析的结果,培养4d后对照组及实验组Lineage-Sca-1+c-Kit+(LSK)细胞数量分别较起始接种细胞中LSK细胞数量扩增了(2.62±0.09)倍及(5.67±0.11)倍.造血集落形成实验结果表明,对照组形成了(49.25±6.99)个集落,而实验组可形成(69.95±3.40)个集落.培养基中添加LDN193189(500 nmol/L)培养 4d后,LSK细胞数量为(3.16±0.43)×104 个/孔,较未添加LDN193189组下降了(38.27±7.44)%.qRT-PCR结果表明,与对照组相比,BMP4处理组降低了蛋白质毒性应激相关基因和促凋亡相关基因的表达.结论 BMP4处理能够促进小鼠骨髓造血细胞的体外扩增,并有效提高细胞中HSPC的增殖及造血细胞集落形成能力.

关键词：骨形成蛋白4、造血干/祖细胞、体外扩增、蛋白毒性应激、凋亡

所属期刊栏目：47

分类号：R331.2(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2023-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：576-583