1型糖尿病脂肪来源间充质干细胞成骨分化的实验研究

摘要：

目的 探究1型糖尿病小鼠脂肪来源间充质干细胞的成骨分化能力.方法 10只21～28日龄C57BL/6雄鼠随机分为两组,糖尿病组小鼠(n=5)腹腔注射链脲佐菌素溶液(STZ)诱导小鼠1型糖尿病(T1DM)模型,正常组小鼠(n=5)注射柠檬酸钠缓冲液作为对照,连续注射5 d,1周后监测小鼠随机血糖,连续测量3 d.分别提取两组小鼠腹股沟和性腺脂肪,分离培养脂肪间充质干细胞(ADSC),通过细胞形态、流式细胞术检测细胞表型,体外多向诱导分化鉴定细胞特性.为进一步比较两组细胞成骨分化能力的差异,取第3代(P3代)两组ADSC进行体外成骨诱导分化,分别在诱导的第3、5、7天进行碱性磷酸酶(ALP)染色,实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹检测细胞成骨分化关键转录因子表达.结果 T1DM组小鼠连续3 d随机血糖≥16.7 mmol/L,并出现多饮、多食、多尿及体重增长缓慢的典型表现;两组小鼠脂肪组织来源的培养细胞均呈梭形纤维样、贴壁漩涡状生长;流式细胞术结果显示,两组细胞高表达CD29、CD90,低表达或不表达CD11b、CD34、CD45、MHC-Ⅱ;体外诱导分化结果显示,二者均具有体外成脂和成骨分化能力,证实分别获得T1DM小鼠和正常小鼠脂肪来源的间充质干细胞.两组ADSC体外成骨诱导细胞ALP染色结果表明,与NC?ADSC组相比,在诱导的第3、5、7天,T1DM?ADSC组ALP活性低;qPCR结果显示调控成骨分化关键基因RUNX2、OCN、ALP、BMP2的表达降低;Western印迹结果显示,T1DM?ADSC与NC?ADSC相比,成骨分化关键转录因子RUNX2表达下降,而成脂细胞分化关键转录因子CEBPα表达升高.结论 T1DM小鼠来源ADSC体外成骨分化能力显著降低.

关键词：1型糖尿病、链脲佐菌素、脂肪间充质干细胞、成骨分化

所属期刊栏目：47

分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：国家重点研发计划2016YFC1000305

在线出版日期：2023-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：188-195