10.7644/j.issn.1674-9960.2023.01.007
EDⅢK307是西尼罗病毒感染的重要位点
目的 探讨西尼罗病毒EDⅢK307位点对西尼罗病毒包装以及入侵的影响.方法 对西尼罗病毒EDⅢ进行点突变——K307A,再将突变后的表达载体pcDNA3.1-CME K307A与prWNV-Rluc共转染293T细胞,72 h后收集细胞培养上清,通过电镜观察上清中西尼罗假病毒颗粒形态,并利用PCR法扩增病毒基因组NS1片段序列以确证突变假病毒是否包装成功;继而利用上清感染BHK21细胞,通过检测感染后BHK21细胞胞内荧光素酶值来判断突变假病毒对靶细胞的感染性.结果 细胞培养上清中可见比较均一的病毒颗粒,呈圆形、有包膜,直径在40~50 nm;PCR扩增可见基因组NS1特异条带.上述结果均证实成功包装出突变型假病毒颗粒.感染实验显示,与未突变假病毒颗粒相比,K307A位点突变后的假病毒颗粒丧失了感染靶细胞的能力.结论 K307位点很可能参与了西尼罗病毒的感染,是西尼罗病毒与受体结合的关键位点,从而可能成为阻断西尼罗病毒感染药物的重要靶点.
西尼罗假病毒、包膜蛋白、EDⅢ、K307
47
R392.9
国家科技重大专项2018ZX10101003-005-009
2023-02-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
47-50