脐带间充质干细胞来源的外泌体有效扩增脐带血CD34+细胞

摘要：

目的 探讨脐带间充质干细胞外泌体(MSC?Exo)在脐带血CD34+细胞扩增中的作用.方法 采用差速离心法从人脐带间充质干细胞(hUC?MSC)培养上清中分离提取外泌体,透射电镜观察其形态特征,并采用纳米颗粒跟踪分析技术进行鉴定.利用免疫磁珠分选法从新鲜脐带血中分离获得CD34+造血干/祖细胞(HSPC),接种到24孔板中,在含有干细胞因子(SCF)、血小板生成素(TPO)等细胞因子的StemSpan无血清培养基中,实验组加50μg/ml外泌体,对照组加等体积PBS,分别在培养第6和12天,对HSPC扩增数量计数并进行统计分析;利用流式细胞仪检测2种培养条件下HSPC表面标志的表达情况,并于集落培养12 d后进行造血集落形成实验.结果 脐带血CD34+细胞在培养扩增12 d,实验组细胞扩增数量是对照组的1.88倍,两者差异显著(P<0.01);进一步分析表明,培养至第6和12天,实验组中原始造血干细胞(pHSC)(CD34+CD38-CD90+CD45RA-CD49f+)的数量分别是对照组的2.13和3.17倍,差异具有统计学意义(P<0.05);造血集落形成实验显示,集落培养12 d,实验组细胞形成的造血集落数量显著高于对照组,特别是代表原始造血分化潜能的混合系集落形成单位(CFU?GEMM)数量显著提高,是对照组的1.9倍,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 添加脐带MSC?Exo的无血清培养体系,对HSPC的扩增具有更强的促进能力,并能有效提高扩增产物中pHSC的比例.

关键词：人脐带间充质干细胞、外泌体、扩增、CD34+细胞

所属期刊栏目：46

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家重点研发计划;国家自然科学基金

在线出版日期：2022-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：348-354