POSTN基因调控人脐带间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究

摘要：

目的 探讨骨膜蛋白调控人脐带来源间充质干细胞(hUC?MSC)向成骨细胞分化的作用.方法 培养并鉴定hUC?MSC,利用慢病毒载体构建稳定敲低POSTN基因的hUC?MSC(sh?POSTN?MSC)和对照组hUC?MSC(sh?NC?MSC),流式细胞术检测细胞表面标志物,油红O和碱性磷酸酶(ALP)染色比较两组细胞体外成脂和成骨诱导分化能力,实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测成脂分化关键转录因子和成骨分化标志物表达的差异.结果 培养的sh?NC?MSC和sh?POSTN?MSC表面标志物均为CD73+/CD90+/CD105+/CD14-/CD34-/CD45-,POSTN基因敲低后不影响hUC?MSC表面标志物的表达.成脂诱导后,sh?NC?MSC和sh?POSTN?MSC经染色均观察到红色脂滴出现.qRT?PCR结果显示,与自分化组相比,诱导组的脂肪酶(ADI)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达均明显增加(P<0.001).成骨细胞诱导后,sh?NC?MSC和sh?POSTN?MSC经染色均观察到胞内ALP活性;qRT?PCR结果显示,二者诱导组成骨细胞标志物骨桥蛋白(OPN)表达均显著增加(P<0.001,P<0.01),提示sh?NC?MSC和sh?POSTN?MSC具有成脂、成骨分化能力;同时,与sh?NC?MSC成骨诱导组相比,sh?POSTN?MSC成骨诱导组的胞内ALP活性明显降低,OPN和ALP的mRNA相对表达均显著降低(P<0.001).结论 敲低POSTN基因的hUC?MSC成骨诱导分化能力降低,POSTN参与调控hUC?MSC的体外成骨分化作用.

关键词：骨膜蛋白、间充质干细胞、成脂分化、成骨分化、shRNA

所属期刊栏目：46

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家重点研发计划2016YFC1000305

在线出版日期：2022-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：285-293