腺相关病毒注射稀疏标记神经元方法优化研究

摘要：

目的 探究利用腺相关病毒(AAV)稀疏标记策略对神经元进行标记时,不同稀释倍数和注射剂量条件下荧光标记神经元的数量、形态及范围差别,为实现神经元投射纤维的精细结构追踪提供参考.方法 利用携带Cre/LoxP控制系统的AAV,采用小鼠颅内微量注射方式进行表达.在梯度稀释编码Cre重组酶的AAV之后,将携带有DIO表达元件的AAV按照1∶1混合比例注射到目标脑区,注射4周后心脏灌流取脑切片,观察荧光表达情况.结果 在稀释20 000倍50 nl注射剂量条件下可提供较为稀疏且范围较小的标记效果,稀释20 000倍150 nl注射剂量则可实现范围更广且较稀疏的标记,但在稀释10000倍150 nl注射剂量条件下,在注射位点中央区域会出现较为密集的标记.结论 通过比较不同AAV稀释倍数和注射剂量条件下神经元标记情况,发现高剂量较低浓度稀释的AAV可达到更佳的表达效果.该研究为利用稀疏标记病毒开展神经环路和神经元树突棘形态的研究提供了实验依据.

关键词：腺相关病毒;稀疏标记;Cre/LoxP;神经环路;树突棘

所属期刊栏目：45

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金;全军后勤科研计划重点项目;全军后勤科研计划重点项目;军委科技委卓青项目

在线出版日期：2022-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：748-752