SLC25A5基因真核表达载体的构建及其功能验证

摘要：

目的 构建SLC25A5基因的真核表达载体,同时验证该基因与肝癌细胞生长之间的关系.方法 以人乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出SLC25A5的CDS区编码序列,应用双酶切将PCR产物插入到带Flag标签的pCMV?Tag2B载体上,酶切和测序验证后转染到人肝癌HepG2细胞中,通过Western印迹检测其表达情况,CCK?8法、克隆形成实验测定其对肝癌HepG2细胞生长的影响.结果 双酶切结果显示,pCMV?Tag2B?Flag?SLC25A5真核表达载体构建成功;提取质粒转染人肝癌HepG2细胞;Western印迹技术验证该基因蛋白成功表达;CCK?8法和克隆形成实验证明过表达pCMV?Tag2B?Flag?SLC25A5促进肝癌HepG2细胞增殖.结论 pCMV?Tag2B?Flag?SLC25A5真核表达载体构建成功,并证明其可促进肝癌细胞增殖,为进一步研究SLC25A5在肝癌中的发生发展作用奠定了基础.

关键词：SLC25A5基因、癌、肝细胞、HepG2、真核表达、细胞增殖

所属期刊栏目：44

分类号：R735.7;Q786(肿瘤学)

资助基金：黑龙江省自然科学基金联合引导项目;国家自然科学基金优秀青年基金;国家自然科学基金面上项目;全军后勤科研计划重点项目

在线出版日期：2021-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：926-929,946