人AP2β基因慢病毒表达载体的构建及其对肝癌HepG2细胞生长的影响
目的 构建人AP2β基因慢病毒(lentivirus)表达载体,并检测其过表达对肝癌细胞HepG2生长的影响.方法 从人乳腺文库中采用PCR技术扩增出人AP2β基因编码序列,并将其插入pCDH载体,获得pCDH-AP2β真核表达载体;将其与包装载体转染293T,包装成Lenti-AP2β慢病毒并测定病毒滴度,感染肝癌HepG2细胞,Western印迹检测病毒载体介导的AP2β蛋白的表达情况,并进行生长曲线实验研究过量表达AP2β对HepG2细胞生长的影响.结果 双酶切和Western印迹表明,pCDH-AP2β真核表达质粒构建成功,包装成滴度为2.5×107 PFU/ml的Lenti-AP2β慢病毒载体;将此慢病毒载体感染HepG2细胞,Western印迹显示,慢病毒载体成功表达AP2β,生长曲线和克隆形成实验结果 表明,AP2β过表达可抑制肝癌细胞HepG2的生长.结论 构建了AP2β的慢病毒表达载体Lenti-AP2β,在HepG2细胞中过量表达AP2β可抑制细胞的生长,该实验为进一步研究AP2β在肝癌中的功能奠定了基础.
AP2β基因、慢病毒属、载体、肝肿瘤、HepG2细胞
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R735.7(肿瘤学)
国家自然科学基金优秀青年基金项目;国家自然科学基金面上项目;全军后勤科研计划重点项目
2020-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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