m6A修饰RNA结合蛋白YTHDF2的克隆、表达及其活性分析

摘要：

目的 构建YTH结构域m6A结合蛋白2(YTHDF2)重组表达载体,获得具有结合m6A修饰RNA活性的YTHDF2重组蛋白.方法 以 mRNA 为模板采用 RT-PCR 方法扩增 YTHDF2基因编码区序列,构建 pET-28a-YTHDF2重组表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达YTHDF2融合蛋白,利用Ni2+-NTA亲和胶纯化融合蛋白, Ni2+-NTA磁球分析融合蛋白活性.结果与结论 成功构建了 pET-28a-YTHDF2重组表达载体,纯化获得了YTHDF2融合蛋白,该融合蛋白具有结合m6A修饰RNA活性.重组YTHDF2融合蛋白的获得为研究m6A修饰RNA的生物学功能提供了重要工具分子.

关键词：质粒、重组融合蛋白质类、RNA、YTHDF2蛋白、甲基转移酶类、基因表达调控

所属期刊栏目：42

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目91540202,31470782,81773038;国家重点研发计划资助项目2016YFC1303604

在线出版日期：2018-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：34-37