鼠疫耶尔森菌中长度在100nt以内的小RNA缺失株及过表达菌株的构建

摘要：

目的 构建鼠疫耶尔森菌中长度在100 nt以内的小RNA缺失株及过表达菌株的方法.方法 在高拷贝质粒pBAD/HisA的基础上利用定点突变试剂盒制备一个可诱导的转录融合载体作为小RNA的过表达质粒.通过转录组测序、引物延伸并参考已有文献,预测了目的小RNA的存在、大小以及转录起始位点等,将目的小RNA的全长导入到改造后的质粒中并构建小RNA的过表达菌株.结果与结论 成功构建了小RNA sR01、sR02、sR03、HmsA 4株缺失株以及小RNA MicF、HmsA、CpxQ 3株过表达菌株. 建立了基于λ-Red同源重组、100 nt以内短片段小RNA敲除方法和基于定点突变试剂盒改造质粒的小RNA过表达菌株构建方法.

关键词：鼠疫菌、小RNA、λ-Red同源重组、过表达

所属期刊栏目：41

分类号：R378.61(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31430006;国家重点基础研究发展计划资助项目2014CB744405

在线出版日期：2018-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：800-804