通过环介导恒温扩增技术检测空肠弯曲杆菌

摘要：

目的 建立基于DNA环介导恒温核酸扩增法(LAMP)快速检测空肠弯曲杆菌.方法 以空肠弯曲杆菌马尿酸酶基因(hipO基因)为靶序列,设计6套特异性引物进行LAMP反应,通过比较扩增效率筛选出最佳引物用以快速检测空肠弯曲杆菌.对检测方法的特异性进行验证,敏感性与PCR法比较.结果 实时浊度仪监测反应结果表明,LAMP反应在62℃恒温条件60 min 内完成;如果在反应前添加钙黄绿素与氯化锰混合液(FD),黄绿色的阳性结果明显区别于橙色阴性结果.LAMP法最低检出限为6.97×102拷贝/μl,敏感性为PCR法(6.97×103拷贝/μl)的10倍.结论 LAMP法用于快速检测空肠弯曲杆菌具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果判读方便、敏感性高、特异性强等特点,特别适于现场和基层检疫及医疗机构快速诊断.

关键词：hipO基因、DNA介导恒温核酸扩增法、快速检测、空肠弯曲杆菌

所属期刊栏目：41

分类号：R446.5;R378.2(诊断学)

资助基金：国家科技支撑计划资助项目2015BAI13B07;解放军总医院"百病妙诀"扶植项目MJ201403

在线出版日期：2017-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：306-309,317