抗人Her2抗原羊驼纳米抗体的筛选与鉴定

摘要：

目的 获得靶向人Her2纳米抗体.方法 使用重组人Her2蛋白免疫羊驼,分离免疫后羊驼的淋巴细胞提取总RNA,利用PCR技术扩增羊驼IgG的可变区(VHH)基因片段,构建噬菌体表面展示的纳米抗体文库,采用Her2抗原对文库进行亲和筛选,将筛选到的克隆转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG 诱导表达重组蛋白,镍离子亲和层析柱纯化获得纳米抗体并用ELISA技术和Biacore检测其与抗原Her2的亲和力,采用免疫组化方法检测Her2阳性乳腺癌组织中Her2的表达.结果 第二轮筛选后得到2个抗体H3和H5,ELISA结果显示两者都具有抗原结合活性,其中H5的亲和力达8.106×10-10 mol/L.H5可识别乳腺癌组织中Her2抗原的表达.结论 从Her2免疫的羊驼体内,通过噬菌体展示技术筛选获得了1个具有较高抗原结合活性的抗Her2纳米抗体,可用于乳腺癌的病理诊断.

关键词：Her2、纳米抗体、噬菌体展示技术、乳腺肿瘤、诊断

所属期刊栏目：41

分类号：R737.9(肿瘤学)

在线出版日期：2017-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：184-189