10.7644/j.issn.1674-9960.2017.02.003
SIRT1对肝癌细胞耐药敏感性的影响
目的 构建沉默信息调节因子(silent information regulaor,Sir)样蛋白1(Sirtuin 1,SIRT1)的特异性短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,获得敲低SIRT1的肝癌细胞系,以探讨其对肝癌细胞的增殖和耐药敏感性的作用.方法 设计针对SIRT1靶点特异性的干涉序列,连接到经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切的pSicoR-GFP载体,慢病毒包装293T产生病毒,感染肝癌细胞,建立肝癌细胞SIRT1低表达的稳定株.利用实时定量PCR检测SIRT1的干涉效果;通过平板克隆形成实验、CCK8细胞增殖实验检测SIRT1被干涉后对肝癌细胞增殖能力的影响;通过细胞耐药敏感性实验及实时定量PCR检测耐药基因的表达,考察SIRT1干涉对肝癌细胞耐药敏感性的影响.结果 实时定量PCR实验证明该慢病毒干涉载体能显著抑制肝癌细胞中SIRT1的表达,SIRT1干涉可抑制肝癌细胞的增殖能力,下调耐药基因的表达,增强肝癌细胞的药物敏感性.结论 SIRT1抑制肝癌细胞耐药性.
沉默信息调节因子样蛋白1、RNA干扰、基因敲除、肝癌、耐药、间充质干细胞、聚合酶链反应
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R735.7;R979.1(肿瘤学)
国家863计划资助项目2013AA020107;广州市健康医疗协同创新重大专项资助项目201400000003-1;国家自然科学基金资助项目81472341;北京市自然科学基金资助项目7152095
2017-04-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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