10.7644/j.issn.1674-9960.2017.01.008
可溶性Tim-3体外增强免疫应答的作用及机制研究
目的:评价重组人(hTim-3)-Fc融合蛋白在调节免疫应答中的作用及其机制研究。方法分别将重组hTim-3-Fc融合蛋白与人巨噬细胞系 U937细胞、T 淋巴细胞系 Jurkat 细胞及正常人外周血细胞共培养,采用ELISA、实时荧光定量PCR( RT-PCR)和蛋白质免疫印迹( Western印迹)方法检测免疫相关细胞因子水平的变化,探讨重组hTim-3-Fc融合蛋白对免疫细胞活性的影响并阐明机制。结果重组hTim-3-Fc融合蛋白可显著提高免疫细胞活性,表现为U937中IL-8分泌水平,Jurkat细胞IL-2分泌水平,以及人外周血中IL-2和IFN-γ分泌水平显著升高;在mRNA水平,发现重组hTim-3-Fc融合蛋白能显著提高上述细胞中Ⅰ型干扰素(包括IFN-α2、IFN-β1)的表达。在分子机制方面,重组hTim-3-Fc融合蛋白可增强T细胞(Jurkat)及巨噬细胞(U937)中stat-1的磷酸化水平。结论制备的重组人Tim-3-Fc融合蛋白在体外能显著增强免疫细胞活性,有望成为免疫抑制性疾病新的免疫干预药物。
Tim-3、融合蛋白、细胞因子类、U937细胞、Jurkat细胞、T淋巴细胞
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R392
国家自然科学基金面上资助项目81471540;北京市自然科学基金重点资助项目7141007
2017-03-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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