PI3 K在肿瘤坏死因子诱导L929细胞程序性坏死过程中的调控作用研究

摘要：

目的：探讨磷脂酰肌醇3-激酶（ phosphatidylinositol-3-kinase， PI3K）在肿瘤坏死因子α（ tumor necrosis factor alpha， TNFα）诱导细胞程序性坏死过程中的调控作用与机制。方法利用慢病毒介导的RNA干涉技术构建PI3K催化亚基p110α敲低、RIP1敲低及RIP1与p110α双敲低的L929细胞株，Western印迹或RT-PCR验证敲低效果。同时，利用Western印迹检测AKT和混合系激酶区域样蛋白（ MLKL）磷酸化及MLKL多聚化。流式细胞术和显微拍照术检测细胞死亡。结果 PI3K和AKT抑制剂及p110α敲低都可降低AKT磷酸化水平，并阻断TNFα诱导的L929细胞程序性坏死。敲低RIP1并不抑制TNFα与Z-VAD联合诱导的L929细胞程序性坏死，但这种RIP1非依赖性细胞程序性坏死能为p110α敲低抑制。此外，p110α敲低可抑制TNFα与Z-VAD联合诱导的MLKL活化及其介导的细胞程序性坏死。结论 PI3K是调控细胞程序性坏死的重要靶点，可通过RIP1依赖及非依赖性方式激活，进而活化AKT与MLKL，启动TNFα诱导的细胞程序性坏死。

关键词：磷脂酰肌醇3-激酶、肿瘤坏死因子α、细胞程序性坏死、蛋白激酶B、混合系激酶区域样蛋白

所属期刊栏目：41

分类号：Q255;R730.2(细胞生理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31201041；国家重大科技专项重大新药创制资助项目2014ZX09304313-003

在线出版日期：2017-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：25-32