艰难梭菌谷氨酸脱氢酶的表达及抗原性分析

摘要：

目的：构建艰难梭菌（CD）谷氨酸脱氢酶（GDH）的原核表达载体，表达重组蛋白并鉴定其抗原活性。方法以 CD 的 ATCC43255菌株基因组 DNA 为模板，通过 PCR 法扩增 GDH 全长基因片段，构建原核表达载体并转化到大肠杆菌中，IPTG 诱导表达 GDH 蛋白，并用 Ni 柱进行纯化。利用 CD 抗原检测试剂盒对 GDH 抗原区段的抗原性进行鉴定。结果构建的原核表达载体 pET-28a／GDH 可在大肠杆菌中成功表达，获得的 GDH 抗原能与相应抗体产生特异性反应。结论原核表达的 CD 的 GDH 抗原具有很好的抗原活性，为进一步制备相应抗体并建立CD 的 GDH 抗原的免疫检测方法奠定了基础。

关键词：艰难梭菌、谷氨酸脱氢酶、原核表达

所属期刊栏目：40

分类号：R373.25;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：全军后勤科研计划资助项目CWS13J049，AWS15J006；国家自然科学基金资助项目81471998；国家卫生计生委科学研究基金－浙江省医药卫生重大科技计划WKJ-ZJ-1507

在线出版日期：2016-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：710-712,732