抗A型肉毒毒素鼠源性单克隆抗体的制备和鉴定

摘要：

目的：制备与鉴定抗A型肉毒神经毒素重链C端（ heavy chain of botulinum neurotoxin serotype A， BoNT／AHc）特异性鼠单克隆抗体。方法通过纯化BoNT／AHc抗原、免疫BALB／c小鼠并建立杂交瘤细胞以制备鼠单抗，用ELISA、Western印迹实验和抗体分型试剂盒进行分析鉴定，并通过ELISA检测鼠单抗与BoNT／AHc突变体结合，初步鉴定其在BoNT／AHc的结合表位。结果得到纯度较高的BoNT／AHc抗原，制备了4株特异性鼠单抗1A4、3H3、3H7、5H8。间接ELISA结果显示，单抗细胞上清效价均＞3．0×103；Western印迹检测结果显示，单抗均能与BoNT／AHc特异性结合；抗体亚型鉴定结果为1A4、3H7属于IgG1（Κ），3H3属于IgM（Κ），而5H8属于IgG2b （Κ）；叠加ELISA实验表明，4株单抗抗原识别表位相近；用ELISA检测单抗与BoNT／AHc突变体结合实验结果初步确定了4株单抗与BoNT／AHc的结合表位。结论对抗A型肉毒毒素鼠源性抗体完成了制备和鉴定，为肉毒毒素中和抗体的开发与阐明中和抗体的表位奠定了基础。

关键词：肉毒杆菌毒素、A型、重链、抗体、单克隆、中和抗体、突变体、表位

所属期刊栏目：40

分类号：R378.83;R996.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2016-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：322-325