酶解法清除猪皮α-Gal抗原的研究

摘要：

目的 利用脆弱拟杆菌来源的基因重组α-半乳糖苷酶清除猪皮细胞及基质的异种抗原(α-Gal抗原) ,降低猪皮基质敷料的免疫原性. 方法 2月龄健康无皮肤疾患的猪皮皮片,经剖层裁切成不同的规格后,分别经碘酊和75%乙醇溶液浸泡消毒,随后用PBS清洗后进行酶解条件的摸索;采用免疫荧光法检测猪皮的α-Gal抗原,双抗夹心ELISA法检测残留酶,通过对酶解猪皮的残留酶和α-Gal抗原的检测进而优化、改进酶解条件和洗涤条件,以确立最佳酶解工艺. 结果 建立了有效的酶解方法和洗涤方法,酶解后猪皮的α-Gal抗原清除率>90%,残留酶不能检出(间接ELISA法检测微量α-半乳糖苷酶的下限为1 ng/ml). 结论 所建立的酶解工艺和洗涤工艺可有效清除猪皮细胞及基质的α-Gal抗原,建立了制备低免疫原性猪皮敷料的方法.

关键词：猪皮、免疫原性、α-半乳糖苷酶、α-Gal抗原、残留酶

所属期刊栏目：39

分类号：R392.4;R197.39

资助基金：国家科技重大专项资助项目2013ZX09J13110B

在线出版日期：2016-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：938-940