10.7644/j.issn.1674-9960.2015.09.006
鼠疫耶尔森菌外源获得性pPCP1质粒编码小RNA的筛选、鉴定与功能的初步研究
目的:鉴定鼠疫耶尔森菌外源获得性pPCP1质粒编码的小RNA,并评价其在生物膜、压力耐受性和毒力方面的功能。方法基于前期鼠疫菌转录组测序结果,分析获得外源性pPCP1质粒编码的高丰度小RNA,提取鼠疫菌总RNA,利用Northern印迹实验验证这些小RNA存在与否。利用λ-Red同源重组技术敲除pPCP1质粒上已证实的小RNA,并对小RNA缺失株在生物膜褶皱形成、高盐耐受性和致病性等方面进行初步的表型筛选。结果与结论 Northern印迹法鉴定了鼠疫菌pPCP1质粒上7个小RNA的存在。在此基础上,获得5个小RNA的缺失突变株,其中sR3446缺失后鼠疫菌生物膜褶皱形成能力减弱;sR3446、sR3457、sR4338和sR4340缺失后鼠疫菌对高盐环境的耐受能力减弱,而sR6143缺失后对高盐环境的耐受能力增强;sR4338和sR4340缺失后鼠疫菌毒力有所减弱。上述结果提示,鼠疫菌外源获得性pPCP1质粒上的小RNA在鼠疫菌应激和致病过程中可能发挥重要作用。
鼠疫耶尔森菌、pPCP1质粒、小RNA、生物膜、毒力
R378.61(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金资助项目31171248;国家重点基础研究发展计划973资助项目2014CB744405
2015-10-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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