耐万古霉素肠球菌检测基因芯片方法的建立和验证

摘要：

目的：基于基因芯片技术建立一种能快速甄别粪肠球菌、屎肠球菌及万古霉素耐药基因的检测方法。方法根据GenBank中查找的2种常见肠球菌特异性基因序列（ ddl）及万古霉素耐药基因（ vanA，vanB）序列，设计与合成用于检测肠球菌的特异性基因及耐药基因的引物和探针，制备耐万古霉素肠球菌（VRE）检测基因芯片。利用多重不对称PCR法扩增样品中的特异性基因与耐药基因片段，标记产物与基因芯片上的探针杂交，经清洗、化学发光法显色后进行结果分析。在优化的多重PCR体系、杂交反应和化学发光法检测条件下，评价芯片的特异性、灵敏性和重复性。结果共筛选出1对通用引物、4对特异性引物和1条细菌通用探针、4条特异性检测探针。该芯片具有良好的特异性和重复性，灵敏性可达103 CFU／ml。10例临床分离株样本的芯片检测结果与药敏实验基本一致（8／10）。结论初步建立了检测VRE的基因芯片方法，利用此方法可以甄别2种VRE种类并检测其耐药基因。

关键词：万古霉素、肠球菌、粪、万古霉素抗药性、芯片分析技术、耐万古霉素肠球菌、多重PCR、化学发光法

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项资助项目2013ZX10004802-008

在线出版日期：2015-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：514-518