人血浆凝血因子Ⅷ柱纯化前处理方法的比较

摘要：

目的：对人血浆凝血因子Ⅷ（ coagulation factor Ⅷ，FⅧ）制备过程中4种柱纯化前处理方法进行比较并分析其优缺点，为血源FⅧ的纯化制备提供借鉴与参考。方法冷沉淀经Tris溶解后的上清，分别用甘氨酸沉淀法、PEG沉淀法、酸沉淀法和氢氧化铝凝胶吸附法处理；用活化部分凝血活酶（ APTT）法测定样品上清中FⅧ活性，计算总活性回收率和样品的比活性，用非还原性SDS－PAGE电泳比较去除杂蛋白的效果。结果4种处理方法中，甘氨酸沉淀法总活性回收率最高[（94．00±7．60）％]，其次是酸性沉淀法[（89．47±2．60）％]、PEG沉淀法[（80．92±9．67）％]，氢氧化铝吸附法的总活性回收率最低[（78．65±7．52）％]；甘氨酸沉淀法与PEG沉淀法去除杂蛋白的效果优于酸性沉淀法和氢氧化铝吸附法；经4种不同方法处理后，甘氨酸沉淀法所得样品中 FⅧ比活最高[（0．6856±0．1258）IU／mg]，其次是PEG沉淀法[（0．5773±0．0787）IU／mg]、酸性沉淀法[（0．3885±0．0301）IU／mg]，氢氧化铝吸附法所得样品比活最低[（0．2879±0．0472）IU／mg]。结论在上述方法中，甘氨酸沉淀法和PEG沉淀法的总体效果较佳，且因后者操作更加简便、快捷，在实际生产过程中采用PEG沉淀法较为合适。

关键词：人凝血因子Ⅷ、冷沉淀、柱纯化前处理

分类号：R973;R392-33(药品)

资助基金：国家863计划资助项目2012AA021902

在线出版日期：2015-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：199-202