10.7644/j.issn.1674-9960.2015.03.004
人细小病毒B19三种基因型通用核酸检测体系的建立与评价
目的:建立能同时检测人细小病毒B19(简称B19病毒)3种基因型的通用核酸检测( NAT)体系,并进行方法学评价。方法对B19病毒3种基因型代表毒株全序列进行比对,选取其保守区域( NS1区)设计B19病毒的通用引物和探针。为避免假阴性结果,在体系中引入竞争性噬菌体内标。将适宜浓度的内标添加到一系列梯度稀释的参考品质粒中,建立B19病毒实时荧光定量PCR( qPCR)标准曲线。对建立的B19病毒通用NAT体系分别进行敏感性、特异性、重复性等方法学评价。结果建立的B19病毒实时qPCR检测体系的标准曲线在1×109~1× 103拷贝(copies)/μl模板浓度范围内相关性良好。方法学评价显示,体系的最低检测下限为10拷贝/μl;与其他血源传播病毒等无交叉反应;批内和批间实验重复性良好。结论建立了B19病毒3种基因型全检的通用NAT体系,不仅可用于B19病毒感染的诊断,还可用于血液和血液制品中B19病毒的NAT筛查,对于保障输血和血液制品的病毒安全性具有重要意义。
人细小病毒B19、TaqMan荧光定量PCR、核酸检测
R373(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
北京市自然科学基金资助项目7132144
2015-04-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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