10.7644/j.issn.1674-9960.2014.09.015
幽门螺杆菌分泌与重组表达的VacA蛋白的分离纯化及其致细胞空泡效应与凋亡的对比研究
目的:分离纯化幽门螺杆菌分泌和重组表达的细胞空泡毒素抗原( VacA)蛋白,并评价其致细胞空泡效应及致细胞凋亡效应。方法分别从幽门螺杆菌ATCC26695菌株培养上清和重组表达VacA蛋白的pQE30-VacA-E.coliM15基因工程菌中分离纯化VacA蛋白,经酸化后,以不同终浓度(5,10 ng/ml)分别与人胃腺癌AGS细胞共孵24 h,观察致空泡效应,并通过流式细胞术检测细胞凋亡。结果成功分离纯化出幽门螺杆菌分泌和重组表达的VacA蛋白;幽门螺杆菌分泌的VacA蛋白能显著引起AGS细胞的空泡样改变及凋亡(P<0.01),而重组表达的VacA蛋白致细胞空泡样改变及凋亡不显著( P>0.05)。结论幽门螺杆菌分泌的VacA蛋白有良好的空泡毒性及致凋亡效应,而重组表达的VacA蛋白无致空泡及凋亡效应,幽门螺杆菌分泌的VacA蛋白可用于VacA作用机制的研究。
螺杆菌、幽门、细胞空泡毒素、蛋白纯化、细胞凋亡、胃肿瘤
R735.2(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目81171526;重庆市自然科学基金资助项目CSTC 2011 jjA10061
2014-12-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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