Tim-3抗体的生物学活性及应用研究

摘要：

目的：制备抗人Tim-3单抗并评价其生物学活性，为干预Tim-3表达失调引发的疾病提供实验基础。方法制备重组人Tim-3蛋白，常规方法免疫BALB/c小鼠，筛选出阳性克隆，并对其识别、中和活性进行体内外验证，探讨其作为免疫干预手段的可行性。结果①获得一株能够分泌具有较好结合活性的抗人Tim-3单克隆抗体细胞株（克隆号L3D），其分泌的免疫球蛋白亚型为IgG2a；②流式实验结果表明，该抗体能够结合人U937细胞上的Tim-3分子，且与小鼠RAW 264．7细胞上Tim-3有一定的交叉结合活性；③该抗体能够阻断Gal-9分子诱导的人THP1细胞凋亡，具有良好的体外中和活性；④体内注射L3D，显示该抗体能够显著加重脓毒血症模型小鼠病情，提高炎性因子的表达水平，显示出其良好的体内中和活性。结论成功制备一株分泌抗人Tim-3抗体的细胞株，其良好的结合及中和活性为基于Tim-3表达异常相关疾病的干预提供了实验基础。

关键词：Tim-3、抗体、单克隆、L3D、U937细胞、炎性因子、脓毒症

分类号：Q813.2(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家973计划资助项目2013CB530506；国家自然科学基金资助项目81072475，81172800，81272320

在线出版日期：2014-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：617-620,625