10.7644/j.issn.1674-9960.2014.08.012
Tim-3抗体的生物学活性及应用研究
目的:制备抗人Tim-3单抗并评价其生物学活性,为干预Tim-3表达失调引发的疾病提供实验基础。方法制备重组人Tim-3蛋白,常规方法免疫BALB/c小鼠,筛选出阳性克隆,并对其识别、中和活性进行体内外验证,探讨其作为免疫干预手段的可行性。结果①获得一株能够分泌具有较好结合活性的抗人Tim-3单克隆抗体细胞株(克隆号L3D),其分泌的免疫球蛋白亚型为IgG2a;②流式实验结果表明,该抗体能够结合人U937细胞上的Tim-3分子,且与小鼠RAW 264.7细胞上Tim-3有一定的交叉结合活性;③该抗体能够阻断Gal-9分子诱导的人THP1细胞凋亡,具有良好的体外中和活性;④体内注射L3D,显示该抗体能够显著加重脓毒血症模型小鼠病情,提高炎性因子的表达水平,显示出其良好的体内中和活性。结论成功制备一株分泌抗人Tim-3抗体的细胞株,其良好的结合及中和活性为基于Tim-3表达异常相关疾病的干预提供了实验基础。
Tim-3、抗体、单克隆、L3D、U937细胞、炎性因子、脓毒症
Q813.2(生物工程学(生物技术))
国家973计划资助项目2013CB530506;国家自然科学基金资助项目81072475,81172800,81272320
2014-10-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
617-620,625