敲低细胞角蛋白18对氧化应激诱导细胞凋亡的影响

摘要：

目的 研究氧化应激条件下中间纤维蛋白细胞角蛋白(cytokeratin)的抗凋亡作用.方法 利用RNA干扰(RNAi)技术敲低细胞内细胞角蛋白18(CK18)的表达,免疫印迹法检测细胞角蛋白的表达水平,并通过A549细胞建立细胞角蛋白敲低稳定细胞系.利用免疫荧光染色技术观察细胞角蛋白对细胞骨架的影响.利用流式细胞技术检测细胞角蛋白对细胞内ROS(reactive oxygen species)水平及氧化应激诱导细胞凋亡的影响.结果 筛选获得3个干扰效果较好的RNAi序列,成功利用A549细胞建立细胞角蛋白敲低的稳定细胞系(A549-KD).CK18表达敲低导致细胞内多种细胞角蛋白表达广泛下调,并破坏细胞微丝及微管骨架结构.氧化应激条件下A549-KD细胞抗凋亡活性显著降低.结论 细胞角蛋白参与维持细胞骨架结构,对抗ROS诱导的细胞凋亡,提示其在细胞的氧化应激过程中发挥保护作用.

关键词：中间丝、细胞角蛋白、细胞骨架、氧化应激、细胞凋亡

所属期刊栏目：37

分类号：Q245(细胞形态学)

在线出版日期：2013-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：509-513