鼠疫菌Fur蛋白对waaA的转录调控研究

摘要：

目的 从转录水平上研究鼠疫耶尔森菌Fur蛋白对waaA的转录调控机制.方法 提取鼠疫菌野生株(WT)和fur突变株(Δfur)的总RNA,采用引物延伸实验研究waaA的转录起始位点,并根据产物的丰度判断Fur蛋白对waaA的调控关系.构建克隆有waaA上游启动子区的LacZ重组质粒,将重组质粒转入WT和Δfur中,通过测定β-半乳糖苷酶活性来比较两株重组菌中的waaA启动子活性,进一步验证Fur蛋白对waaA的调控关系.PCR扩增waaA启动子区DNA序列全长,并纯化鼠疫菌His-Fur蛋白,通过体外的凝胶阻滞实验,即电泳迁移率变动实验(EMSA)和DNaseⅠ足迹实验验证His-Fur蛋白对waaA启动子区是否具有直接的结合作用.结果 与结论DNaseⅠ足迹实验表明,Fur蛋白对waaA启动子区的结合位置为-204至-150之间的碱基(翻译起始位点为+1);引物延伸实验显示waaA有一个转录起始位点T(-26),且该位点的转录活性直接被Fur蛋白激活.

关键词：鼠疫耶尔森菌、转录调控、Fur、waaA

所属期刊栏目：37

分类号：R378.6(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30930001

在线出版日期：2013-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：498-501