mRNA氧化损伤检测方法的优化及p53 mRNA氧化损伤分析

摘要：

目的 建立并优化检测真核细胞mRNA氧化损伤的方法——反转录阻断-双引物扩增法,检测p53 mRNA氧化损伤.方法 建立非细胞体系和细胞体系mRNA氧化损伤模型,提取RNA并反转录成cDNA,根据所检测mRNA的5’端和3’端各设计一对引物,以cDNA为模板进行实时定量PCR.结果 非细胞体系和细胞体系氧化处理组GAPDH和p53 mRNA的氧化损伤程度均明显高于对照组,且随着过氧化氢浓度增加RNA氧化损伤增强；同时一定限度内降低反转录酶用量能提高检测灵敏度.结论 本研究建立并优化的RNA氧化损伤检测方法能检测特定mRNA对氧化的敏感性及损伤程度,为分析相关疾病造成的RNA氧化损伤以及探索其发病机制和治疗方法提供了技术支持.

关键词：RNA、氧化损伤、p53 mRNA

所属期刊栏目：37

分类号：Q522(核酸)

资助基金：航天医学基础与应用国家重点实验室开放基金资助项目SMFA12K16;北京市自然科学基金资助项目5112029;国家自然科学基金资助项目31070702,31170713

在线出版日期：2013-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：180-183,200